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DNA合成仪基本组成结构和性能

 DNA合成仪基本组成结构和性能
(一)DNA合成仪压力系统
  系统压力由超纯氩(99.998%)提供。氩气密度高、氧污染少,因此高压氩气常常用来启动真空辅助系统及供给合成仪调节器。进入合成仪的氩气通过10txm的颗粒过滤器后送到3个压力调节器,调节器将氩气输送到特定的压力阀来增加试剂和溶剂瓶的压力。调节器也将氩气供给柱子和试剂阀体。
(二)试剂和溶剂储液瓶
  仪器上每个储液瓶都有特定的位置,储液瓶盖座和仪器上所有号码相对应,仪器上的位置或储液瓶的编号都是1—8(5个碱基的仪器为1~5)、9、10、11、12、14、15、18和19(配有自动分析的仪器)。将1~8号瓶向上推,在聚四氟乙烯插塞周围有一“O”形环,每一瓶颈内部形成一气密塞。因为试剂输送系统是要加压的,所以要使瓶   子与仪器之间的密封塞保持气密性。选择合适的一次性塞及在瓶上加“O”形环可以加强气密性。
(三)DNA合成仪压力管路及输送管路
  每个瓶子都有一个氩气压力管道及输送管道进入瓶盖插塞,对于亚磷酰胺,1—8号瓶其压力管道也作为排气管。氩气管要保持在液体水平以上,而输送管却伸到瓶的底部。当阀门正确设置打开时,储液瓶上部空间由氩气加压,液体被推进输送管,流到其目的地。
(四)亚磷酰胺瓶排气
  除了加压外,亚磷酰胺瓶都是用压力排气管排气的。把亚磷酰胺放人仪器前,要用氩气排除空气使其净化。净化是通过输送管输送气体,当气体输送到瓶内时,空气经压力排气管排出。这是由瓶子更换步骤自动完成的。废液瓶是输送系统的低压侧,必须将出口与大气相通。要确保排气管通到通风柜。如果排气管阻塞,将会产生反压,试剂和溶剂的输送会受到抑制。
(五)DNA合成仪输送阀块
  试剂输送系统包括两个试剂阀块(8碱基仪器有3个)及2个或4个柱阀块。阀块控制气体和化学试剂流人柱子及出口。除亚磷酰胺和四唑以外,试剂和溶剂都被同时输送到所有活化柱。当有多个活化柱时,对流速的细微变化,以自动调节每个柱子的输送次数来补偿。每一个5—端口柱阀块将流出物导人废液口、DMT收集口,或DNA收集瓶,它也控制用于除去或冲洗柱内和柱阀块内的试剂的氩气。
(六)辅助真空
  对于阀块的适当运行,关键是隔膜形成一个圆顶小空隙,每次电磁阀打开时,抽气泵为每个阀块提供了辅助真空,辅助真空在隔膜的螺线管一侧形成,使隔膜形成一圆顶空隙。
(七)柱子
  起始结合在载体上的核苷酸是装在一次性的柱子中,除柱体外,还有2个固定过滤板和2个接头,所有的部件都由惰性材料制成。固定过滤板是多孑L性聚苯乙烯固定在两端盖子中。人口和出口都是母路厄氏(1uer)接头,与仪器的公路厄氏接头配对。柱子是对称的(没有顶端和底部、前后之分),可以以任何方式与公路厄氏接头相连接。每一个柱子都用颜色编号,表示不同的起始核苷酸,以及有一个唯一的连续顺序号码。正常的流路是从底部进入,通过向上输送液体,使CPG颗粒上升并保持悬浮状态。溶剂和试剂的流速已经设置好,能使颗粒适当地混合。
(八)路节流阀
  试剂通过底部的luer接头,流到柱子,如果没拧上下面的一个luer接头,应会在一个圆柱形的玻璃流路节流阀上发现。试剂通过流路节流阀中一个很小的通道流到柱子。小量的试剂可以在流路节流阀中结晶,长期这样会造成流路阻塞。
(九)废液和排气
  大多数化学试剂输送的蕞终点是废液瓶,废液瓶是一个空立着的10L的聚苯乙烯容器,可放在合成仪附近的地板上或放在低于仪器的附近工作台上。排气管将废气导人适当的排气装置,如排烟罩
(十)电导池
  电导流动池是为了测定在每个DNA合成循环内释放的DMT阳离子的总电导而设计的。流动池是由一空隙隔开的两个电极组成,在空隙之间应用一小电压。DMT阳离子流过电导池时起电导作用。
(十一)电池
  DNA合成仪一般带有锂电池,可以使用几年。当主电源断开时,所有的合成参数都被保留下来。这些参数包括储存的DNA序列,用户设定的循环、步骤和功能,以及瓶子使用资料等。如果正在合成中电源出现故障,合成将被中断,只有主电源恢复时合成才可重新开始。电池还保持合成仪内部的时钟计时。
(十二)控制器
  控制器指导和初始合成仪的所有活动,它的主要部分是软件、微处理机、显示屏幕、键板及相关的电子部件。软件控制合成的所有必要操作并由微处理机来解释和执行。软件储存在一个可取出的存储卡中,这个存储卡插在仪器的背面。合成信息显示在液晶显示屏上,通过选择键板上的键可与仪器交流。软件是“菜单驱动”,通过按适当的键,可选择一项,给予指令。为了完成自动合成,软件应用一个包含一系列步骤的循环来完成全部化学反应。

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